تهیه کونژوگه بر پایه آلژینات سودوموناس آئروژینوزا و بررسی ایمنی زایی در حیوان آزمایشگاهی

عفونت های بیمارستانی از جمله معضلات و مشکلات مهم پزشکی در کشور های توسعه یافته و در حال توسعه محسوب می شود. سودوموناس آئروژینوزا سومین عامل عفونت های بیمارستانی است. سودوموناس آئروژینوزا بیماریزای مهم و عامل منتهی به مرگ در مبتلایان به فیبروز سیستیک، بیماری نئوپلاسمی و سوختگیهای شدید می باشد. این باکتری با تشکیل بیوفیلم، خود را در برابر سیستم ایمنی میزبان و عوامل ضدمیکربی مختلف محافظت می نماید. با مصرف گسترده پادزیست ها سویه های سودوموناس آئروژینوزا مقاوم به چند دارو در سراسر جهان به طور فزایندهای افزایش یافته است. ایمونوپروفیلاکسی ممکن است راه موثری برای کنترل عفونت های ناشی از این باکتری باشد. آلژینات به عنوان یکی از اجزای اصلی تشکیل دهنده بیوفیلم یک فاکتور بیماریزایی مهم به شمار می آید. در این مطالعه به منظور افزایش ایمونوژنیسیته آلژینات از روش کونژوگاسیون استفاده شد. آلژینات به طور جداگانه به دو حامل متفاوت کونژوگه شد. حامل اول وزیکول غشا خارجی باکتری نایسریا مننژیتیدیس سروتیپ b (omv) و حامل دوم یک پپتید سنتتیک (erranavrdvlvne) برگرفته از پروتئین f غشا خارجی سودوموناس آئروژینوزا (ompf) بود که با کمک ابزارهای بیوانفورماتیکی طراحی شد. جهت ارزیابی واکنش سیستم ایمنی، گروههای موشی سه مرتبه و در فواصل دو هفته ای با آلژینات غیر کونژوگه ، کونژوگه آلژینات-omv ، کونژوگه آلژینات-پپتید294 و گروههای کنترل به صورت زیر جلدی واکسینه شدند. نتایج الایزا نشان داد که در گروههای موشی ایمن شده با کونژوگه ها افزایش تیتر آنتی بادی در مقایسه با آلژینات غیر کونژوگه و یا گروههای شاهد معنی دار بود. همچنین آزمون اپسونوفاگوسیتوز نشان داد که میزان باکتری های کشته شده ( رقت 1:32) با کونژوگه آلژینات-omv و آلژینات-پپتید294 به ترتیب 81 % و 53 % بود که در مقایسه با گروههای کنترل معنی دار بود.( p<0.05). میزان بقا موشهای ایمن شده با کونژوگه آلژینات-omv و آلژینات-پپتید294 بعد از ایجاد عفونت حاد ریوی با یک سویه بالینی جدا شده از بیماران مبتلا به سیستیک فیبروسیس (به شماره 6494) به ترتیب 83 % و 66 % بود. میزان بقا بعد از چالش با سویه استاندارد (m 8821) سودوموناس آئروژینوزا به ترتیب 100 % و 83 % بود. در ادامه نشان داده شد که موشهای ایمن شده با کونژوگه ها به طور معنی داری قادر به پاکساری ریه از سودوموناس آئروژینوزا سویهm 8821 و یا سویه بالینی سودوموناس آئروژینوزا (6494) در مقایسه با گروه کنترل می باشند. نتایج این تحقیق امکان بررسی دو کونژوگه آلژینات-omv و آلژینات-پپتید294 را جهت مطالعات بعدی و با هدف معرفی یک واکسن جدید بر ضد سودوموناس آئروژینوزا را فراهم می آورد.